Tin tức - Giới thiệu công nghệ chiết tách axit nucleic

ⅠNaxit ucleicigiới thiệu

Axit nucleic được chia thành axit deoxyribonucleic (DNA) và axit ribonucleic (RNA), trong đó RNA được chia thành RNA ribosome (rRNA), RNA thông tin (mRNA) và RNA chuyển (tRNA) theo các chức năng khác nhau của nó.DNA chủ yếu tập trung ở nhân, ty thể và chloroform, trong khi RNA chủ yếu phân bố ở tế bào chất.Là cơ sở vật chất của biểu hiện gen, chiết xuất axit nucleic đóng vai trò cực kỳ quan trọng trong nghiên cứu sinh học phân tử và chẩn đoán phân tử lâm sàng.Nồng độ và độ tinh khiết của quá trình chiết axit nucleic sẽ ảnh hưởng trực tiếp đến quá trình PCR, giải trình tự, xây dựng vectơ, tiêu hóa enzyme và các thí nghiệm khác tiếp theo.

Ⅱ Phương pháp chiết xuất và tinh chế axit nucleic

① Phương pháp chiết xuất phenol/chloroform

Chiết xuất phenol/chloroform là một phương pháp cổ điển để chiết xuất DNA, chủ yếu sử dụng hai dung môi hữu cơ khác nhau để xử lý mẫu, hòa tan axit nucleic dựa trên DNA trong pha nước, lipid trong pha hữu cơ và protein giữa hai pha.Phương pháp này có ưu điểm là chi phí thấp, độ tinh khiết cao và hiệu quả tốt.Nhược điểm là vận hành phức tạp và thời gian dài.

② Phương pháp trizol

Phương pháp Trizol là một phương pháp cổ điển để tách chiết RNA.Phương pháp Trizol được chia thành pha nước và pha hữu cơ sau khi ly tâm bằng cloroform, trong đó RNA được hòa tan trong pha nước, pha nước được chuyển sang ống EP mới, thu được kết tủa sau khi thêm isopropanol, sau đó tinh chế ethanol.Phương pháp này phù hợp để tách chiết RNA từ mô, tế bào và vi khuẩn động vật.

③ Phương pháp tinh chế cột ly tâm

Phương pháp tinh chế cột ly tâm có thể hấp thụ DNA đặc biệt thông qua các vật liệu hấp phụ ma trận silicon đặc biệt, trong khi RNA và protein có thể truyền qua trơn tru, sau đó sử dụng PH thấp muối cao để kết hợp axit nucleic, rửa giải giá trị PH cao muối thấp để tách và tinh chế axit nucleic.Ưu điểm là nồng độ tinh chế cao, độ ổn định cao, không cần dung môi hữu cơ và chi phí thấp.Nhược điểm là phải ly tâm từng bước, nhiều bước thao tác hơn.

④ Phương pháp hạt từ tính

Phương pháp hạt từ tính là tách mẫu mô tế bào thông qua lysate, giải phóng axit nucleic trong mẫu, sau đó các phân tử axit nucleic được hấp phụ đặc biệt trên bề mặt của hạt từ tính, trong khi các tạp chất như protein và đường vẫn còn trong đó. chất lỏng.Thông qua các bước tách mô tế bào, liên kết hạt từ tính với axit nucleic, rửa axit nucleic, rửa giải axit nucleic, v.v., cuối cùng thu được axit nucleic tinh khiết.Ưu điểm là vận hành đơn giản, thời gian sử dụng ngắn, không cần ly tâm từng bước.Nó có yêu cầu kỹ thuật thấp và có thể thực hiện hoạt động tự động và hàng loạt.Sự kết hợp cụ thể giữa hạt từ tính và axit nucleic làm cho axit nucleic chiết xuất có nồng độ và độ tinh khiết cao.Nhược điểm là giá thị trường hiện tại tương đối đắt.

⑤ Các phương pháp khác

Ngoài bốn phương pháp trên, còn có phương pháp Cracking sôi, phương pháp muối đậm đặc, phương pháp tẩy rửa anion, phương pháp siêu âm và phương pháp enzyme, v.v.

Ⅲ Loại chiết xuất axit nucleic

Foregene có nền tảng PCR trực tiếp hàng đầu thế giới, nền tảng phân lập RNA hai cột (chỉ DNA + RNA).Các sản phẩm chính bao gồm bộ dụng cụ phân lập DNA/RNA, loạt thuốc thử PCR và thuốc thử PCR trực tiếp trong phòng thí nghiệm.

① Chiết tách RNA tổng số

Các mẫu chiết RNA tổng số bao gồm máu, tế bào, mô động vật, thực vật, vi rút, v.v. Có thể thu được độ tinh khiết và nồng độ cao của tổng RNA thông qua chiết xuất RNA tổng số, có thể được sử dụng trong RT-PCR, phân tích chip, dịch mã in vitro, nhân bản phân tử, Dot Blot và các thí nghiệm khác.

Liên quan đến tiền thânBộ dụng cụ cô lập RNA

Bộ tách RNA tổng số động vật--Chiết xuất nhanh chóng và hiệu quả RNA tổng số có độ tinh khiết cao và chất lượng cao từ các mô động vật khác nhau.

Bộ phân lập RNA tổng số tế bào--Có thể thu được RNA tổng số có chất lượng cao và tinh khiết cao từ nhiều tế bào nuôi cấy khác nhau trong 11 phút.

Bộ tách chiết RNA tổng số thực vật--Nhanh chóng trích xuất RNA tổng số chất lượng cao từ các mẫu thực vật có hàm lượng polysaccharide và polyphenol thấp.

Bộ phân lập RNA virus--Nhanh chóng phân lập và tinh chế RNA virus từ các mẫu như huyết tương, huyết thanh, dịch cơ thể không có tế bào và dịch nổi nuôi cấy tế bào.

② Tách chiết DNA bộ gen

Các mẫu chiết DNA bộ gen bao gồm đất, phân, máu, tế bào, mô động vật, thực vật, vi rút, v.v. Chiết tách DNA bộ gen có thể được sử dụng trong tiêu hóa enzyme, xây dựng thư viện DNA, PCR, chuẩn bị kháng thể, phân tích lai Western blot, chip gen, cao -thông lượng trình tự và các thí nghiệm khác.

Liên quan đến tiền thânBộ dụng cụ cô lập DNA

Bộ tách DNA mô động vật--Trích xuất và tinh chế nhanh DNA bộ gen từ nhiều nguồn, chẳng hạn như mô động vật, tế bào, v.v.

Bộ Midi DNA máu (1-5ml)--Nhanh chóng tinh chế DNA bộ gen chất lượng cao từ máu chống đông (1-5ml).

Bộ cách ly DNA thẻ Buccal Swab/FTA--Nhanh chóng tinh chế DNA bộ gen chất lượng cao từ mẫu tăm bông/thẻ FTA.

Bộ phân lập DNA thực vật--Nhanh chóng tinh chế và thu được DNA bộ gen chất lượng cao từ các mẫu thực vật (bao gồm các mẫu thực vật polysacarit và polyphenol)

③ Chiết xuất plasmid

Plasmid là một loại DNA phân tử nhỏ hình tròn trong tế bào, là chất mang phổ biến cho quá trình tái tổ hợp DNA.Phương pháp chiết xuất plasmid là loại bỏ RNA, tách plasmid khỏi DNA bộ gen của vi khuẩn và loại bỏ protein và các tạp chất khác để thu được plasmid tương đối tinh khiết.

Bộ Plasmid Mini chung--Nhanh chóng tinh chế DNA plasmid chất lượng cao từ vi khuẩn biến nạp cho các thí nghiệm sinh học phân tử thông thường như biến nạp và tiêu hóa enzyme

④ Các loại trích xuất khác, trích xuất miRNA, v.v.